Estandarización del protocolo de ensayo de unidades formadoras de colonias de células progenitoras hematopoyéticas

Alvarado-Valverde, Stephanie

2009

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Proyecto de Graduación (Bachillerato Ingeniería en Biotecnología). Instituto Tecnológico de Costa Rica. Escuela de Biotecnología, 2009.

El trasplante de células madre hematopoyéticas se utiliza actualmente para el tratamiento de ciertas enfermedades hematológicas. Una técnica utilizada para evaluar la capacidad de proliferación in vitro de las células madre hematopoyéticas colectadas en muestras de sangre periférica, sangre periférica movilizada y médula ósea es el cultivo de unidades formadoras de colonias granulocito-eritroides-macrófagos-megacariocitos (UFC-GEMM), unidades formadoras de colonias granulocito-macrófago (UFC-GM), unidades formadoras de brotes eritroides (UFB-E) y unidades formadoras de colonias eritroides (UFC-E) en un medio de metilcelulosa. Esta práctica de especialidad se llevo a cabo en el Laboratorio de Investigación y Enseñanza de Hematología del Hospital San Juan de Dios y el Laboratorio de Ingeniería en Tejidos del Instituto Tecnológico de Costa Rica, con el objetivo de estandarizar los procedimientos de ensayos de unidades formadoras de colonias de células progenitoras hematopoyéticas a partir de muestras de sangre periférica, sangre periférica movilizada y médula ósea. Después de obtener la aprobación del Comité Institucional de Bioética en Investigación de la Caja Costarricense de Seguro Social se estandarizaron los protocolos de obtención, anticoagulación, traslado y descongelación de muestras de médula ósea y sangre periférica; el protocolo de aislamiento de células mononucleadas por gradiente de densidad y el ensayo de unidades formadoras de colonias mediante el cultivo de células mononucleadas en un medio de metilcelulosa. Los ensayos realizados permitieron generar patrones para la identificación de las colonias UFC-E, UFC-GM y UFC-GEMM obtenidas con el medio MethoCult®.

Células madre hematopoyéticas; Unidades formadoras de colonias; UFC; Trasplante de células madre; Médula ósea; Sangre periférica;