Optimización del protocolo de extracción de ADN de Mycosphaerella fijiensis

Aguilar-Rivera, Xiomara

2009-05-07T14:50:39Z

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Corporación Bananera Nacional S.A.

Costa Rica constituye uno de los mayores productores de banano a nivel internacional, sin embargo la empresa bananera ha venido decayendo en los últimos años producto de las inmumerables plagas, el surgimiento de nuevas enfermedades, las trabas arancelarias y no arancelarias, factores que han aumentado los costos de producción. Una de las mayores plagas que afecta el cultivo del banano en Costa Rica corresponde a la enfermedad causado por el hongo ascomicete Mycosphaerella fijiensis, llamada Sigatoka Negra. En el presente trabajo se muestra la optimización del protocolo de extracción de ADN de Mycosphaerella fijiensis. En la investigación se evaluaron tres tratamientos de cultivo distintos (medio de cultivo sólido, medio de cultivo sólido con filtro y medio de cultivo líquido), seis cantidades de buffer de extracción (900 μl con carbón activado, 900 μl sin carbón activado, 300 μl, 600 μl, 1200 μl y 1500 μl) y la validación del uso del carbón activado durante el proceso de extracción de ADN para mejorar la amplificación de las pruebas moleculares. También se evaluó el rendimiento en la producción de biomasa del hongo de los tratamientos de cultivo empleados. De los tratamientos que se evaluaron el que mejores resultados mostró fue el tratamiento con medio de cultivo líquido con la cantidad de 300 μl de buffer de extracción. Por medio de las pruebas de amplificación se pudo demostrar que el uso de carbón activado durante el proceso de extracción mejora significativamente los resultados que se obtienen. En la prueba de rendimiento en la producción de biomasa se obtuvo que el medio semisólido con filtro, así como el medio de cultivo líquido producen mayor cantidad de micelio.

Proyecto de Graduación (Bachillerato en Ingeniería en Biotecnología). Instituto Tecnológico de Costa Rica, Escuela de Biología, 2006.

Biología molecular; Enfermedades agricolas; Control de plagas; Plagas del banano; Mejoramiento genético;